Цитохімія

вивчає розподіл і утримання всередині клітини хім. соед. , Динаміку їх перетворень в процесах життєдіяльності (в т. Ч. При патології). Ц. виникла в 1-й пол. 19 в. ; значно вдосконалена і широко використовується з сер. 20 в. для диагностич. цілей, в медицині, біохімії та ін.
Осн. методи Ц.: 1) мікрохімія - виділення певних клітинних структур (напр., мітохондрій або рибосом) шляхом диференціального центрифугування і здійснення хім. аналізу їх складу. 2) мікроспектрофотометри - визначення в-в за допомогою мікроскопа-спектрофотометра безпосередньо в клітці по характерному спектру поглинання (напр., Нуклеїнових к-т з поглинання пуринами і пірімі-динамічних УФ випромінювання). 3) Мікроінтерферометр - оцінка маси клітини по зрушенню фази поляризованого світла. Після екстракції певного в-ва можна виміряти його вміст у клітині. Мікроспектрального і інтерферометріч. методи дозволяють проводити хім. аналіз живих клітин. 4) Цитофотометрія забарвлених клітин - якостей. і (або) кількостей. визначення в-ва в клітці шляхом фотометрії пофарбованого продукту, к-рий утворюється при взаємодій. аналізованого в-ва з барвником або ін. в-вом. Вимірювання здійснюють, використовуючи мікроскоп, монохроматор, фотоумножувач і реєструючий пристрій. Для кількостей. досліджень застосовують також аналізатори зображень.Один з точних методів цитофотометрії - р-ція Фельгена [взаємодій. альдегідних груп, що виникли в результаті кислотного гідролізу ДНК, з фуксінсерністой к-тій (реактив Шиффа) з утворенням червоно-малинового комплексу, к-рий специфічно характеризує розподіл ДНК і її кількість в ядрі]. Активні барвники (ПРОЦІОН) утворюють ковалентні зв'язки з різними реакційноздатними групами білків або вуглеводів, фарбуючи клітинні структури. В результаті разл. р-ций виявляються ферменти, визначається їх локалізація і активність. 5) Флуоресцентна мікроскопія і цитофлуорометрії. Здійснюють р-цію в-ва з флуоресцирующим маркером (див., Напр., Ліпідні зонди ) і потім по інтенсивності флуоресценції визначають кількість цього в-ва. 6) Авторадіографія - визначення локалізації певного метаболич. процесу і його інтенсивності в клітинних структурах завдяки запровадженню в організм або в середу клітинної культури метаболітів, мічених радіонуклідами, і приготування цітоавтографа (препарату з клітин і фотоемульсії, доурую виявляють після експозиції). 7) іммуноцітохіміі -Виявлення розташування певного антигену всередині клітини шляхом отримання комплексів між антитілами, кон'югованими з барвниками, і аналізуються антигенами.
В більшості методів Ц. може використовуватися також електронний мікроскоп.
Розділ Ц. - гистохимія. Тими ж методами, що в Ц., оцінюється розподіл і утримання в-в в різних ділянках тканини або в органі (напр., В разл. Частинах печінки, в судинах і т. Д.).
Завдяки розвитку методів Ц. вперше були сформульовані ідеї про провідну роль нуклеїнових к-т в синтезі білка, в розвитку організмів і спадковості (Б.В. Кедровський, Т. Касперсоном, 30-е рр. 20 в.). У 40-х рр. методами Ц. було доведено сталість змісту ДНК в хромосомному наборі (К. і Р. Вендрель) і на цій основі визначено общебіол. значимість поліплоїдних клітин (несуть дек. гомологічних наборів хромосом) і з'ясована важлива роль клітинної полиплоидии (кратне збільшення числа наборів хромосом) в зростанні і розвитку тварин і рослин. При використанні радіоактивних попередників синтезу ДНК, гл. обр. 3 Н-тимідину (К. Леблон, Л. Н. Жинкин, 60-і рр.), Визначені важливі закономірності поновлення клітинних популяцій і регенерації тканин. При застосуванні 3 H-попередників РНК і білків вивчені закономірності переміщень макромолекул всередині клітини. Завдяки значить. удосконалення флуоресцентної мікроскопії (Е. М. Брумберг, М. Н. Мейсель, 60-е рр.) визначено зміни структури хроматину, що характеризують його активність. При вивченні кінетики утворення клітинних білків цітохім. і биохим. методами в 60-70-х рр. відкритий ритм синтезу білка. Визначено ін. Метаболич. ритми такий же околочасовой періодичності (концентрації АТФ і ін. сполуки. з макроергіч. зв'язками, поліамінів, деяких іонів, зміна рН всередині клітин і активності мн. ферментів). У физиол. дослідженнях знайдені такі ж ритми дихання організмів, частоти серцевих скорочень, активності мозку, поведінки тварин. У роботах 80-х рр. при гібридизації ДНК клітинного ядра з клонованої ДНК певного гена встановлено положення цього гена в хромосомі.
Цітохім. методи використовують в медицині, зокрема, для діагностики і прогнозу лікування злокачествен. пухлин.

Літ. : Пірс Е., Гистохимія, пров. з англ. , М., 1962; Бродський В.Я., Трофіка клітини, М., 1966; Введення в кількісну цитохімія, пров. з англ. , М., 1969; Зеленін А. В., Взаємодія Амінопохідні акридину з кліткою, М., 1971; Роджерс Е., Авторадіографія, пров. з англ. , М., 1972; Агроскин Л. С., Папая Г. В., Цітофотомстрн ", Л., 1977; Іванов В. Б., Активні барвники в біології, М., 1982; Бродський В. Я., Нечаєва Н. В., Ритм синтезу білка, М., 1988.

В. Я. Бродський.

Хімічна енциклопедія. - М.: Радянська енциклопедія. Під ред. І. Л. Кнунянц. 1988.